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唐氏综合征产前筛查系统

核准日期:2007年1月29日

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药品名称:

唐氏综合征产前筛查系统

贝喜

Downs Syndrome Screening System

Tang Shi Zong He Zheng Chan Qian Shai Cha Xi Tong

成份:



【适用仪器】
1.200μl及1000μl单通道可调移液器,配套一次性吸管尖头;
2.200μl 8通道可调移液器,配套一次性吸管尖头;
3.蒸馏水;
4.玻璃管和试剂瓶(用于混合显色液A和显色液B及配制清洗液);
5.吸水纸或纸巾;
6.酶标仪;(含450nm滤光片)
7.电脑。(CPU主频要求高于500,内存高于128M)
【样本要求】
抽取孕中期(14~20周)孕妇外周血2ml(孕周以B超或末次月经法计算),置一次性采血管内,室温静置1-2小时后2000转/分离心15分钟,吸取血清。若不能及时检测,血清标本应低温冻存,检测时应将标本融化后混合均匀,并避免反复冻融。血清标本在4℃冰箱只能存放一个星期。已稀释的血清不宜存放。所有标本均看作有潜在感染性的物品,操作和保存时按国家标准执行。

【试验方法】

一、试剂准备
1、测前使所有试剂达到室温(18~25℃,下同)。
2、将30ml浓缩清洗液用870ml蒸馏水做1:30倍稀释,摇匀备用,作为清洗液。

二、样本AFP浓度的测定
1、AFP标准品的稀释
(1)向AFP标准品F(40IU/ml)瓶中加入0.6ml稀释液,混匀;
(2)向AFP标准品B、C、D、E管中分别加入300μ1稀释液;
(3)从AFP标准品 F瓶中取300μ1混匀的液体加到AFP标准品E管中,混匀;
(4)从AFP标准品E瓶中取300μ1混匀的液体加到AFP标准品D管中,混匀;
(5)依此类推,AFP标准品C、B的制备同上,AFP标准品A即为稀释液;
(6)AFP标准品A、B、C、D、E、F的浓度依次为0、2.5、5、10、20、40IU/ml,标准品稀释后需在短期内用完。
2、质控品的稀释
AFP质控品1和2:分别加入0.6ml稀释液,混匀;
3、加样
(1)根据AFP标准品、质控品以及待测标本标记抗体包被板(切记不要与hCG抗体包被板搞混!);
(2)AFP的6个标准品及2个质控品均直接取100μ1加入相应孔内;
(3)在待测标本的孔中先分别加入80μ1稀释液;
(4)直接取20μ1待测标本加到已加入80μ1稀释液的AFP抗体包被板中(AFP检测最终稀释度为1:5);
(5)将加好样的酶标板水平轻轻晃动以混匀样本,然后盖上封板膜,置于37℃孵育1小时。
4、洗板
甩去孔内液体,用稀释好的清洗液加满各孔,略静置一下,甩去板内液体,再加入清洗液,重复操作共5次,拍干。
5、酶标抗体反应
(1)将AFP酶标抗体100μ1/孔加入相应的孔中,注意不要将AFP和hCG搞混;
(2)盖上封板膜,置于37℃孵育1小时;
(3)重复洗板操作。
6、显色
(1)每孔先加入50μ1显色液A,再分别加入50μ1显色液B,水平轻轻晃动;
(2)室温避光静置30分钟;
(3)每孔加入200μ1终止液,终止反应。
7、比色
用酶标仪于450nm波长下读取光密度值(OD值)。

三、 样本hCG浓度的测定
1、hCG标准品的稀释
(1)向hCG标准品F(200mIU/ml)瓶中加入0.6ml稀释液,混匀;
(2)向hCG标准品B、C、D、E管中分别加入300μ1稀释液;
(3)从hCG标准品 F瓶中取300μ1混匀的液体加到hCG标准品E管中,混匀;
(4)从hCG标准品E瓶中取300μ1混匀的液体加到hCG标准品D管中,混匀;
(5)依此类推,hCG标准品C、B的制备同上,hCG标准品A即为稀释液;
(6)hCG标准品A、B、C、D、E、F的浓度依次为0、12.5、25、50、100、200mIU/ml,标准品稀释后需在短期内用完。
2、质控品的稀释
hCG质控品1和2:分别加入0.6ml稀释液,混匀。
3、待测标本的稀释(1:250稀释)
(1)在血清稀释板上稀释,每一份标本需要用两孔;
(2)先做1:25倍稀释:在第一孔中加入120μ1稀释液,再加入5μ1待测血清,反复吹打混匀;
(3)再做1:10倍稀释:在第二孔中加入45μ1稀释液,再从第一孔中取5μ1混合好的样本加入其中,反复吹打混匀。
4、加样
(1)根据hCG的标准品、质控品以及待测标本标记抗体包被板(切记不要与AFP抗体包被板搞混!);
(2)hCG的6个标准品及2个质控品均直接取100μ1加入相应孔内;
(3)在待测标本的孔中先分别加入80μ1稀释液;
(4) 从血清稀释板里已经做了1:250倍稀释的样本中取20μ1加到已加入80μ1稀释液的hCG抗体包被板中(hCG检测最终稀释度为1:1250);
(5)将加好样的酶标板水平轻轻晃动以混匀样本,然后盖上封板膜,置于37℃孵育1小时。
5、洗板
甩去孔内液体,用稀释好的清洗液加满各孔,略静置一下,甩去板内液体,再加入清洗液,重复操作共5次,拍干。
6、酶标抗体反应
(1)将hCG酶标抗体100μ1/孔加入相应的孔中,注意不要将AFP和hCG搞混;
(2)盖上封板膜,置于37℃孵育1小时;
(3)重复洗板操作。
7、显色
(1)每孔先加入50μ1显色液A,再分别加入50μ1显色液B,水平轻轻晃动;
(2)室温避光静置30分钟;
(3)每孔加入200μ1终止液,终止反应。
8、比色
用酶标仪于450nm波长下读取光密度值(OD值)。

四、质量控制
1.若样本浓度超过标准曲线范围,可将标本进一步稀释后再做检测;
2.若样本的OD值低于标准品A的OD值,可相应减少稀释的倍数再做检测;
3.AFP质控品1应为2.5-7.5IU/ml,AFP质控品2应为30-38IU/ml,标准曲线相关系数(r)应≥0.95,否则实验失败,应重做。
4.hCG质控品1应为36-66mIU/ml,hCG质控品2应为121-177mIU/ml,标准曲线相关系数(r)应≥0.95,否则实验失败,应重做。

五、结果分析
1.将AFP浓度测定的标准品、质控品及标本的OD值输入配套的数据分析软件;
2.将hCG浓度测定的标准品、质控品及标本的OD值输入配套的数据分析软件;
3.将标本对应的孕妇的年龄(单位:岁)和孕周(单位:周)输入配套的数据分析软件;
4.通过数据分析软件,计算唐氏综合征或胎儿其他染色体异常的危险系数;
5.危险系数的临界值为1/275:
1)当危险系数大于临界值,建议做产前诊断,如抽取羊水,做羊水细胞培养染色体核型分析等;或直接人工流产,终止妊娠;
2)当危险系数小于临界值,则胎儿为唐氏综合征的危险较小,可继续妊娠。

【产品性能指标】
1、最低检出量
AFP:2.0 IU/ml
hCG:15 mIU/ml
2、测定范围
AFP:0-40 IU/ml
hCG:0-200 mIU/ml
3、测定精密度
AFP:≤12%
hCG:≤12%
4、本系统危险系数临界值为1/275,筛查假阳性率为5%。

所属类别:

化药及生物制品>>诊断用药>>其他诊断用药物

规格:

本品有两个规格:
1)48人份/盒;
2)96人份/盒。

注意事项:

1.请详细阅读本品说明书;
2.每次检测必须同时做AFP和hCG的标准曲线及质控品,不能使用以前做过的标准曲线;
3.如果一个试剂盒一次使用不完,且几次检测时间间隔较长,建议将剩余的标准品及质控品置于低温(0℃以下)冰箱冷冻保存,下一次使用前取出,融化后混匀再使用(酶标抗体不宜低温冷冻);
4.建议一个试剂盒(48人份)最好一次使用完,若条件不允许也不要分两次以上使用,这样不但标准品及质控品不够用,而且会造成浪费(每次都要有8孔来作标准品及质控品),同时标准品及质控品的反复多次冻融会对检测结果造成影响;
5.如果条件允许,建议将标准品和质控品做双孔,结果以两孔的平均值计算;
6.一次未用完之包被板条应密封保存,贮藏及应用时不要将试剂暴露于强热、光下;
7.本试剂盒仅供体外诊断用,一个盒应作为整体应用,不要将不同批号的试剂混合用,并请在有效期内使用;
8.含大量脂质、严重黄疸及溶血或加热灭活之标本均可能影响检测结果;
9.建议按《产前诊断技术管理办法》的有关规定,使用本品。

贮藏:

2~8℃,避光保存。

有效期:

6个月

生产企业:

上海复旦张江生物医药股份有限公司

【企业名称】 上海复旦张江生物医药股份有限公司
【地址】 上海市浦东新区蔡伦路308号
【省份/国家】 上海市