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泪液乳酸脱氢酶

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泪液乳酸脱氢酶介绍:

泪液中的LDH(EC1.1.1.27)和MDH(EC1.1.1.37)主要来自眼角膜上皮。它们在泪液中的浓度约为血清中该酶浓度的20倍。泪LDH主要含M亚基,以LDH5和LDH4含量最高。泪液MDH同工酶,用醋纤膜电泳,可分离出MDHs和MDHm,健康人泪液以MDHs为主。

泪液乳酸脱氢酶正常值:

LDH: 1.29-9.02U/L
LDH同工酶:LDH1 0.66±0.51%
MDH活性: 0.25-2.2U/L
MDH同工酶:MDHs 80%-98.1%
以MDHm>20%为异常
LDH/MDH:<69岁者3.96±0.7
>70岁者4.55±0.51

泪液乳酸脱氢酶临床意义:

异常结果:在细菌性角膜溃疡和角结膜化学伤时,泪LDH和MDH活性下降。凡角结膜上皮损伤,LDH同工酶H/M比值和MDHm均有不同程度升高,但MDHm更能反映角膜组织损害的情况和病变程度。如在角膜溃疡和可疑干性角结膜炎(KCS),MDHm升高而泪LDH的H/M比值却无显著变化。
泪LDH同工酶和LDH/MDH比值的测定有助于沙眼和慢性结膜炎的鉴别诊断。两者泪液LDH的H/M比值均明显下降,但沙眼时,泪液LDH/MDH比值无变化,而且LDH的M亚基升高更显著。
需要检查人群:角膜疾病的诊断。

泪液乳酸脱氢酶注意事项:

不合宜人群:一般无特殊人群。
检查前禁忌:用手揉眼睛,这样会使眼睛感染,加重病情,影响检查效果。
检查时要求:配合医生指示做好相关检查。

泪液乳酸脱氢酶检查过程:

(1)比色法:
① 乳酸钾、乳酸钠也可作为LDH底物,但因其为水溶液,含量不够准确,且保存不当易产生酮酸类物质,抑制酶促反应。而乳酸锂为固体,稳定,易于称量。
② 除二乙醇胺缓冲液外,也可用Tris或焦磷酸缓冲液,避免了原金氏法中甘氨酸缓冲液对LDH的抑制作用,提高了阳性检出率。
③ 比色应在5-15min内完成,否则吸光度降低。
④ 结果>2500U时,可用生理盐水稀释标本后再测,其结果乘以稀释倍数。
(2)连续监测法:
① 标本勿溶血,当溶血达Hb 0.8g/L时,LDH活性可升高58%。
② 标本于室温(25℃)保存,2天内酶活性稳定,冰箱保存酶活性降低,-20℃过夜LDH3、LDH4则全部失活。
③ 用血清或肝素抗凝血浆测定结果满意,草酸盐可抑制LDH活性。
④ 复溶后溶液变浊或初始吸光度>0.5应弃去。
⑤ 利用正逆双向反应均可测定乳酸脱氢酶活性,但因反应温度、底物和缓冲液浓度不同,其参考区间也有差异。以乳酸和NAD为底物,在340nm监测吸光度增高速率为正向反应,以LD-L表示;以丙酮酸和NADH为底物,监测340nm吸光度下降速率为逆向反应,以LD-P表示。正逆反应两法相比,LD-L法的主要优点是:A.正向反应底物液的稳定性比逆向反应的稳定性大,前者冰箱可保存6个月以上,而后者仅几天;B.速率反应的线性范围(吸光度对监测时间t作图)较宽;C.重复性比LD-P好。由于逆向反应速度比正向反应速度快,其参考值约为LD-L的2倍。

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